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DNA鑒定之焦磷酸測序法
http://www.jfuj.com.cn/      2013-07-26 10:49       來源:上海親子鑒定中心法醫物證司法鑒定所
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焦磷酸測序法(pyrosequencing)的原理是在單管中的每一輪測序反應中只加入一種dNTP,若該dNTP與模板配對,DNA聚合酶就可以將其摻人到引物鏈中并釋放出等摩爾的焦磷酸基團(PPi),PPi最終被特定的酶轉化為可見光信號,并由檢測設備量化為一個峰值,每個峰值的高度與反應中摻入的核苷酸數目成正比(Ahmadian et a1.,2006; Ronagi,2001)。隨即加入下一種dNTP,繼續DNA鏈的合成,直到讀出全鏈的序列。相對于傳統測序技術面言.pyrosequencing是一項全新的DNA測序技術,不需要電泳,對于較短的目標片段(如100bp左右)尤其有效,甚至可以在lOmin內準確地完成其序列測定,十分快捷、準確。

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