隨著高通量DNA檢測技術(shù)的發(fā)展,在擴(kuò)增之前需要有快速自動化的DNA定量檢測技術(shù)。為此,英國法庭科學(xué)服務(wù)部( FSS)開發(fā)了PicoGreen檢測法,可在96孔微量滴定板上檢測少至0. 25ng/ml的雙鏈DNA。PicoGreen是一種熒光螯合染料,當(dāng)與雙鏈DNA結(jié)合時,它的熒光信號顯著增強(qiáng)。
進(jìn)行微量滴定板定量時,在195出含有PicoGreen染料的溶液中加入5出的樣品。每份樣品放在96孔板單獨(dú)的一個孑L中,用熒光計檢測。96孔板包括80個檢測樣本和16個校準(zhǔn)樣本,30分鐘內(nèi)可完成分析。這些樣本通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線做比較得到定量結(jié)果。這種定量對調(diào)整STR復(fù)合擴(kuò)增反應(yīng)中DNA的加入量很有幫助。而且此方法已在機(jī)械臂式工作站上實(shí)現(xiàn)自動化。它的缺點(diǎn)是對樣本中總的DNA進(jìn)行定量,對人類DNA沒有特異性。
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