為了確保提取出的DNA是來(lái)自人類而不是細(xì)菌之類的其他來(lái)源，DNA咨詢委員會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)9.3要求進(jìn)行人類特異的DNA定量。只有當(dāng)DNA提取后，才能進(jìn)行可靠的定量和定性。對(duì)于大多數(shù)PCR反應(yīng)，確定樣本中DNA的量是必要的，因?yàn)镻CR反應(yīng)的最佳模板濃度范圍是較窄的，例如，ABI的Profiler PlusTM和CofilerTM復(fù)合擴(kuò)增試劑盒特別要求DNA模板量在1-2.5ng，會(huì)得到最優(yōu)的結(jié)果(ABI，1998)。Promega的STR試劑盒也是在同樣的DNA模板濃度范圍才會(huì)有最佳的結(jié)果(Krenke et a1．，2002)。過(guò)量的DNA模板會(huì)導(dǎo)致分析中的分裂峰形或者峰高超出分析范圍。過(guò)少的DNA模板會(huì)導(dǎo)致等位基因“丟失”，因?yàn)镻CR反應(yīng)沒(méi)能擴(kuò)增到DNA片段。這種現(xiàn)象也稱隨機(jī)效應(yīng)。
早期經(jīng)典的DNA定量方法有260nm渡長(zhǎng)處的吸光度值和在熒光燈下觀察溴化乙啶染色凝膠上的熒光。不幸的是這些方法不夠靈敏，并且會(huì)消耗寶貴而難得的檢材。另外，吸光度法對(duì)DNA沒(méi)有特異性，蛋白質(zhì)或提取過(guò)程殘留的苯酚會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性信號(hào)，會(huì)給出錯(cuò)誤的過(guò)高讀數(shù)e為克服這些問(wèn)題，出現(xiàn)了很多DNA定量的新方法，包括斑點(diǎn)雜交法、熒光微量滴定法和實(shí)時(shí)定量PCR。更多詳情：http://www.qinzijianding.cn
