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DNA鑒定之復(fù)合擴(kuò)增的特點
http://www.jfuj.com.cn/      2013-07-26 10:49       來源:上海親子鑒定中心法醫(yī)物證司法鑒定所
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STR基因座由于串聯(lián)重復(fù)序列只有2-7bp,等位基因片段比較小,等位基因數(shù)目相對有限,較容易擴(kuò)增,各基因座之間擴(kuò)增條件基本相似;片段長度范圍小,因此幾個不同的基因座可以安排在同一反應(yīng)管中進(jìn)行擴(kuò)增,這種把二個或二個以上的基因座放在同一個反應(yīng)管中同時擴(kuò)增,叫復(fù)合擴(kuò)增。單個STR基因座擴(kuò)增等位基因數(shù)少,信息量有限,實際案件鑒定常須聯(lián)合檢測8-12個基因座,才能達(dá)到類似DNA指紋的同一認(rèn)定水平;多個STR基因座復(fù)合擴(kuò)增,明顯提高了單次檢測信息量,一次檢測可以達(dá)到個人同一認(rèn)定,但靈敏度比單基因座擴(kuò)增低。例如四基因座復(fù)合擴(kuò)增體系,其靈敏度為100pgDNA,低于100pg基因組DNA復(fù)合擴(kuò)增時會出現(xiàn)一些等位基因丟失現(xiàn)象。

不論STR的單基因座擴(kuò)增還是多基因座復(fù)合擴(kuò)增,PCR反應(yīng)體系仍由PCR反應(yīng)緩沖液、dNTPs、模板DNA、引物、DNA聚合酶即Mg2+成分組成,只是復(fù)合擴(kuò)增中引物的對數(shù)相對多些。在確定復(fù)合擴(kuò)增反應(yīng)熱循環(huán)參數(shù)時,擴(kuò)增條件并不是每個基因座所特異的、最適的,故在實驗設(shè)計時要考慮到各基因座間擴(kuò)增效率的均衡。更多詳情:http://www.qinzijianding.cn
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